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培養(yǎng)箱:為珍貴的細胞樣品提供穩(wěn)定的家

二氧化碳培養(yǎng)箱中,用層流組織培養(yǎng)罩一起是任何細胞培養(yǎng)的支柱實驗室以**于它通常是在北卡羅萊納州大學提供給進入的調查包的一部分萊恩伯格綜合癌癥中心。

因為在決定哪個孵化器可能適合您的實驗室時需要考慮很多事情 - 從尺寸,成本和防止和處理污染的能力,到用戶界面,如何調節(jié)溫度,濕度和氣體 - 其他重要的考慮因素**初可能會被忽視。在這里,我們研究一些顯而易見的,而對于新的合作有些不是很太明顯,決策點2孵化器。

大小事項

定義“標準尺寸”的二氧化碳培養(yǎng)箱  可能是一項具有挑戰(zhàn)性的任務。

這就是說,典型的CO2培養(yǎng)箱中在大約五**七立方英尺,或140-**200升,范圍,允許它被放置在工作臺或地板上。

“一般來說,今天所有的孵化器都是獨立的,但可以堆疊 - 大多數(shù)人會得到一堆兩個,” Lineberger組織培養(yǎng)機構的長期主管Steve Oglesbee說。

他指出,**好提前知道放置孵化器的位置,這樣可以在門打開方向正確的情況下進行訂購。“這取決于空氣來自哪里,因為當你打開它時,你不希望房間加熱或空調空氣吹進一個房間 - 所以右邊或左邊的鉸鏈會對阻擋它產生很大的影響。 “雖然門可能是可逆的,但可能需要服務電話才能這樣做。

通??梢杂嗁從_輪或滾輪平臺,用于干式夾套,落地式安裝。這不僅使重新定位孵化器更容易,“它真的很棒,因為它可以讓你更快地到達儀器的背面,” 奧克蘭兒童醫(yī)院研究所的科學家David Killilea說。Killilea創(chuàng)建并管理了一個學術核心設施。

夾克和粉絲

曾幾何時,幾乎所有細胞培養(yǎng)箱的室都用水套封閉。水的熱質量特性產生的內部溫度保持相當一致和恒定(只要門保持關閉),即使在電源故障的情況下也是如此。作為額外的好處,水有助于抑制任何振動。但是這種孵化器非常重,需要在移動之前將它們排干。這種類型的培養(yǎng)箱可能需要一段時間才能達到或恢復到工作溫度。它們容易泄漏。它們需要維護,以免造成污染。

大多數(shù)仍在運作的孵化器都是水夾套的。但是,新建,擴建和升級實驗室購買的大多數(shù)孵化器都采用了干燥技術(空氣夾套,直接加熱或混合系統(tǒng))。

過去幾十年的改進使這些孵化器能夠與水套模型的性能相等(除了保持溫度不通電),此外還提供高熱滅菌周期。

供應商使用不同的技術來確保腔室內的空氣在成分和溫度上是均勻的。市場上的大多數(shù)孵化器都有流動的粉絲,“可以防止孵化器內的分層......并確保所有條件的快速恢復,”賽默飛世爾科技**全球細胞培養(yǎng)**Mary Kay Bates指出。“我們還在我們的氣流上放置了一個HEPA過濾器,以捕獲在空氣中循環(huán)的污染物。” 

對于Thermo Scientific Heracell™VIOS CO2培養(yǎng)箱,當門打開時風扇關閉,以幫助減少空氣交換。其他供應商提供帶有泵或風扇的孵化器,它們像“II級引擎蓋”一樣,具有垂直方向的空氣。因此,當你打開孵化器的門時,你就會有這種垂直的層流,這有助于防止孵化器內的東西進出,孵化器外面的東西進入,“Oglesbee評論道。

全球許多制造商 - 包括Eppendorf和NuAire--都提供無風扇設計,消除潛在的污染和振動源。“這不僅僅是引力 - 不是完全被動的,”BMT科學部業(yè)務部門經理Rick Ellison指出。在BMT的情況下,三個程控加熱電路用于差分控制熱量,從而產生自然對流。 

保持簡單,保持清潔

隨溫度,CO 2和濕度很好地控制在現(xiàn)代培養(yǎng)箱,也許是**迫切的一般問題是污染的預防和消除:從其他培養(yǎng)物或從外部導入的東西的培養(yǎng)箱,交叉污染內細菌或真菌的生長。

許多孵化器設計有光滑,無縫的內部表面,以**大限度地減少生長,使設備易于清潔。“整個室可以拆卸,擦拭干凈并在不到三分鐘的重新組合,”麗貝卡利諾,微量離心北美的CO產品經理表示,2孵化器公司的,  Galaxy系列。

華盛頓大學轉基因資源項目的項目經理羅伯特·亨特(Robert Hunter)選擇了銅內部代替其他昂貴的附加物,該項目的核心經歷了幾次真菌爆發(fā)。但是,Killilea不喜歡純銅氧化時形成的“丑陋的綠色/棕色銅綠”,也不喜歡**終脫落的灰塵,因此他選擇了“有足夠的銅來抗菌”的不銹鋼合金。

甚**可以選擇通過管道系統(tǒng)后面隱藏的紫外線清潔空氣。 

日常維護,如每周擦拭,更換水和水盤以及更換HEPA過濾器(如果適用),可以有很長的路要走。

Oglesbee在您購買之前要小心,以確保這些過濾器可以訪問,并且可以由實驗室人員輕松更改。

當污染確實發(fā)生時 - 有一句格言“它不是,但是什么時候”-vendors有各種各樣的處理方法。在干式夾套培養(yǎng)箱中**常見的是濕熱循環(huán)或干熱循環(huán); 這些通常是一夜之間,但有些更快。在過去,一些孵化器需要準備,例如移除無法忍受熱量的傳感器 - 確保找出您想要購買的儀器的程序。也可以使用其他不太常見的選擇,例如H 2 O 2或其他化學滅菌。

深呼吸,保持涼爽

隨著積累的數(shù)據(jù)支持細胞在更多生理缺氧條件下表現(xiàn)更好的觀點 - 尤其是干細胞,3D培養(yǎng)物和未適應培養(yǎng)的原代細胞等細胞 - 許多研究人員正在尋找能夠降低氧含量的培養(yǎng)箱。這通常通過允許氮氣抵消氧氣來實現(xiàn),并且它需要氧氣傳感器以及氮氣調節(jié)。“這不是你可以添加的東西。你必須以這種方式訂購孵化器,“貝茨說。“但你可以點一個缺氧培養(yǎng)箱,關閉選項直到你需要它,投資未來。”許多缺氧培養(yǎng)箱提供分開的內部玻璃門,允許研究人員一次進入一個架子,減少整體氣體交換。

供應商也制作高氧培養(yǎng)箱。“他們不那么受歡迎了。這是一個小眾應用,“貝茨指出。

如果研究人員將設備 - 振動器或顯微鏡 - 或許 - 放入孵化器中,他們可能需要電源以及可能需要其他電纜到外部。Oglesbee建議確保設計用于此目的的端口并相應地計劃孵化器的放置。如果該設備產生足夠的熱量 - 特別是如果房間本身非常溫暖 - 可能需要具有制冷能力的設備。

CO2培養(yǎng)箱旨在保護珍貴的細胞培養(yǎng)物安全和快樂。為了讓用戶滿意,可以付出大量的花里胡哨 - 從自動消毒到密碼保護,數(shù)據(jù)記錄和板載幫助屏幕 - 都需要付出代價。